移液器校准操作标准程序
1、目的：建立移液器校准标准程序。
2、范围：适用于实验室移液器的校准。
3、程序：
3.1校准用本实验室万分之一分析天平，天平刻度容量值等级要与移液器测试器量相匹配；
容量范围 | 刻度示值 |
10μl以下 | 0.001mg |
10－100μl | 0.01mg |
100μl以上 | 0.1mg |
3.2测试液体
水为去离子蒸馏水，并且静置于称量室24小时以上；
3. 3测试环境
无通风的房间，水温恒定在±0.5℃，移液器和空气温度在20－25℃之间，相对湿度必需在55％以上；
3. 4选定校准体积：
3. 4. 1 拟校准体积；
3. 4. 2 移液器标定体积的中间体积；
3. 4. 3 最小可调体积（不小于拟定体积的10%）
4、校准步骤
4. 1测试环境中水温，确定水校准因子Z
Temperature °C | Factor Z ml/g | Temperature °C | Factor Z ml/g |
15 | 1.0020 | 23 | 1.0035 |
15.5 | 1.0020 | 23.5 | 1.0036 |
16 | 1.0021 | 24 | 1.0038 |
16.5 | 1.0022 | 24.5 | 1.0039 |
17 | 1.0023 | 25 | 1.0040 |
17.5 | 1.0024 | 25.5 | 1.0041 |
18 | 1.0025 | 26 | 1.0043 |
18.5 | 1.0026 | 26.5 | 1.0044 |
19 | 1.0027 | 27 | 1.0045 |
19.5 | 1.0028 | 27.5 | 1.0047 |
20 | 1.0029 | 28 | 1.0048 |
20.5 | 1.0030 | 28.5 | 1.0050 |
21 | 1.0031 | 29 | 1.0051 |
21.5 | 1.0032 | 29.5 | 1.0052 |
22 | 1.0033 | 30 | 1.0054 |
22.5 | 1.0034 |
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4. 2称量三种校准体积样本（以100~1000ul移液器为例）
称量样本 | 1000ul | 500ul | 200ul |
1 |
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2 |
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3 |
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4 |
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5 |
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6 |
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7 |
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8 |
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9 |
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10 |
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平均值(mg) | S/10 | S/10 | S/10 |
校准值(mg) | 1000*Z | 500*Z | 200*Z |
偏差值(mg) | S/10-1000*Z | S/10-500*Z | S/10-200*Z |
注：数值为正表示实际计量量偏大，校准操作中需要调整数值至实际测量值。
4. 3将校准结果与表中的允许质比较，若结果在允许值范围内，移液器的校准即为正确。反之移液器必须再进行调整和校验。按下表指示数据设定移液量：
移液器规格 | 设定移液量 | 容量允许值 | 移液器规格 | 设定移液量 | 容量允许值 |
0.5～10 ul | 2ul | 1.8ul~2.2ul (±0.2mg) | 20~200ul | 50ul | 48.5ul~51.5ul (±1.5mg) |
5ul | 4.6ul~5.4ul (±0.4mg) | 100ul | 98.0 ul～102.0 ul (±2.0mg) |
10ul | 9.6ul~10.4ul (±0.4mg) | 200ul | 197.0 ul～203.0 ul (±3.0mg) |
5～40 ul或 5～50 ul | 10ul | 9.6ul~10.4ul (±0.4mg) | 100～1000 ul | 200ul | 196.0 ul～204.0 ul (±4.0mg) |
20ul | 19.2ul~20.8ul (±0.8mg) | 500ul | 492.5 ul～507.5 ul (±7.5mg) |
40ul | 38.8ul~41.2ul (±1.2mg) | 1000ul | 985.0 ul～1015.0 ul (±15mg) |
50ul | 48.5ul~51.5ul (±1.5mg) |
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例一：100~1000ul移液器在1000ul、500ul、200ul的偏差值分别为：+8.0mg、+6mg、+3mg；
该检测结果表示移液器的实际计量量在各点处都是偏大的，估算最利调节量为-5mg，调节后偏差分别为：+3mg、+1mg、-2mg；
根据实际使用情况，如果实际使用中只会用到1000ul量程，可根据用户需求设定调节量-8.0mg，调节后偏差分别为：0mg、-2mg、-5mg；（注：此时除了1000ul处，其余各点的计量量均是不准确的，同时，调节后的移液器无法通过计量检测。）
5、Brand移液器调节示范
1、检查量程，设定移液器至标准量程。
2、打开标签盖，移除标签。如图2。
3、使用曲别针或枪头移除保护膜片。
4、向右方推动红色调节滑轨，提起容量调节轮，然后释放红色调节滑轨。如图4。
5、打开量程锁，调整数值至实际测量的平均体积。如图5。
6、向右方推动红色调节滑轨，按下容量调节轮，然后释放红色调节滑轨，如图6。
7、重新称量，确认平均体积符合上表中的要求。
8、重新装入保护膜片和标签。
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